Kad šūnas mēs kultivējam

šūnu rūpnīcair piesārņoti, lielāko daļu no tiem ir grūti apstrādāt.Ja piesārņotās šūnas ir vērtīgas un tās ir grūti iegūt atkārtoti, to noņemšanai var izmantot šādas metodes.

1. Lietojiet antibiotikas

Antibiotikas ir efektīvākas, iznīcinot baktērijasšūnu rūpnīcas.Kombinētās zāles ir efektīvākas nekā zāles atsevišķi.Profilaktiskās zāles ir efektīvākas nekā zāles pēc inficēšanās.Profilaktiskajai ārstēšanai parasti tiek izmantota dubultā antibiotika (penicilīns 100 u/ml plus streptomicīns 100 μg/ml).Pēc piesārņojuma tīrīšanas metodei jābūt 5 līdz 10 reizes lielākai par parasto daudzumu.Zāles jālieto 24 līdz 48 stundas pēc pievienošanas un pēc tam jāaizstāj ar parasto kārtību.Kultūras šķidrums.Šī metode var būt efektīva piesārņojuma sākumposmā.Papildus penicilīnam un streptomicīnam izmantotās antibiotikas var ietvert arī gentamicīnu, kanamicīnu, polimiksīnu, tetraciklīnu, nistatīnu utt. Parasti lieto 400 līdz 800 μg/ml kanamicīna vai 200 μg/mL tetraciklīna.Barotne tiek mainīta ik pēc 2 līdz 3 dienām un nodota ārstēšanai 1 līdz 2 paaudzēs.Pēdējos gados ir ziņots, ka 4-fluor, 2-hidroksihinolīns (Ciprofloxacin, Cip), Pleu-romutilīna atvasinājums (Pleu-romutilīna atvasinājums, BM-Cyclin2: BM-1 un tetraciklīna atvasinājums (BM-2)) ir antibiotikas. efektīva mikoplazmas iznīcināšanā, ja to lieto atsevišķi vai kombinācijā.Visas šīs trīs antibiotikas sagatavo 250x koncentrētos šķīdumos PBS un uzglabā -20°C vēlākai lietošanai.Lietošanas koncentrācija Cip ir 10 μg/mL, BM-1 ir 10 μg/mL un BM-2 ir 5 μg/mL.Lietojot, vispirms aspirējiet piesārņoto barotni, pievienojiet RPMI1640 barotni, kas satur BM-1, pēc tam aspirējiet barotni pēc 3 dienām, pievienojiet RPMI1640 barotni, kas satur BM-2, un kultivējiet 4 dienas un tā tālāk 3 dienas pēc kārtas. .kārtas, līdz ar 33258 fluorescējošās krāsošanas mikroskopiju tiek pierādīts, ka mikoplazma ir izvadīta, tad kultivēšanai un pasāžai pievieno normālu barotni 3-4 reizes.

2. Apstrāde ar apsildi

Inkubējot piesārņotu audu kultūru 41°C temperatūrā 18 stundas, mikoplazma var iznīcināt, taču tai ir negatīva ietekme uz šūnām.Tāpēc pirms ārstēšanas ir jāveic iepriekšēja pārbaude, lai noskaidrotu karsēšanas laiku, kas var maksimāli iznīcināt mikoplazmu un vismazāk ietekmēt šūnas.Šī metode dažreiz ir neuzticama.Ja vispirms apstrādā ar zālēm un pēc tam karsē 41°C, efekts būs labāks.

3. Izmantojiet mikoplazmai specifisku serumu

Mikoplazmas piesārņojumu var noņemt ar 5% trušu mikoplazmas imūnserumu (hemaglutinācijas titrs 1:320 vai augstāks).Tā kā specifiskā antiviela var kavēt mikoplazmas augšanu, tā kļūst negatīva 11 dienas pēc antiseruma terapijas un paliek negatīva 5 mēnešus vēlāk.ir negatīvs.Tomēr šī metode ir apgrūtinošāka un nav tik ērta un ekonomiska kā antibiotiku lietošana.

4. Citas metodes

Papildus iepriekšminētajām piesārņojuma noņemšanas metodēm pastāv arī dzīvnieku inokulācijas un sterilizācijas metodes, makrofāgu fagocitozes metodes, bromouracila pievienošanas metodes piesārņotajam.kultūras pudelesun pēc tam tos apstarojot ar gaismu un filtrēšanas metodēm utt., bet tie visi ir apgrūtinošāki un neefektīvāki.Tāpēc, tiklīdz notiek mikoplazmas piesārņojums, ja vien tam nav īpaši svarīgas vērtības, tas parasti tiek izmests un atkārtoti kultivēts.

lūdzu, sazinieties ar Whatsapp un Wechat: +86 180 8048 1709