Šūnu pasāžas kultūra attiecas uz kultūras sadalīšanu mazās daļās un atkārtotu inokulāciju citā kultūras traukā (pudelē) turpmākai kultivēšanai.Augstas efektivitātes šūnu kratītājsir parasts suspensijas šūnu kultūras palīgmateriāls, tāpēc kā izmantot augstas efektivitātes šūnu kratītāju šūnu pārejai?
Pēc savas būtības suspensijas šūnas nav pielipušas, tāpēc nav nepieciešami fermenti, lai tās atdalītu no augstas efektivitātes kratītāja virsmas.Laboratorijā, lai veiktu suspendēto šūnu pāreju, parasti tiek izmantota tiešā caurlaide un centrbēdzes caurlaide.Kad tiek novērots, ka šūnas ir par 80 līdz 90 procentiem aizaugušas (šūnu suspensija kļūst dzeltena), šūnas ir gatavas pārejai.
Ja šūnas aug labi zem mikroskopa, var izmantot tiešu eju.Vide šajāaugstas efektivitātes kratīšanas kolbatika proporcionāli sadalīta jaunajā kultivēšanas kolbā un tika pievienota svaiga barotne.Šūnu blīvums tika novērots nākamajā dienā, lai noteiktu, vai šķidrums ir nepieciešams.
Ja šūnu stāvoklis ir slikts, jāizmanto centrbēdzes pasāžas metode.Pirmkārt, šūnu suspensija tiek pārnesta uzcentrifūgas caurule, centrifugē pie 1000 apgr./min 5 minūtes, pēc tam supernatantu izmet, šūnu nogulsnes maigi izkliedē un šūnas atkārtoti suspendē ar svaigu barotni.Visbeidzot ar salmiņu uzsūc atbilstošu daudzumu šūnu suspensijas, ievieto jaunākultūras pudele, un pievieno atbilstošu daudzumu svaigas barotnes.Turpiniet kultivēt.
lūdzu, sazinieties ar Whatsapp un Wechat: +86 180 8048 1709
Publicēšanas laiks: 18.04.2023