Pēc šūnu suspensijas mehāniskās līzes ir daudz šūnu fragmentu.Kā noņemt šos fragmentus?Apskatīsim dažādas pieejas:

1. Izmantojiet atšķaidīšanas metodi.Atšķaidot šūnas, tās var arī vairoties, to kļūs arvien vairāk, un attiecīgi arī šūnu atlieku kļūs arvien mazāk.
2. Ir arī dabiska apmetne.Šūnas nosēžas ātrāk nekā lielākā daļa fragmentu: : pārvietojiet šūnu suspensiju uzcentrifūgas caurule, un, kad lielākā daļa šūnu nogrimst, augšējo šķīdumu var atsūkt un pēc tam pievienot kultūras šķīdumam, lai suspendētu šūnas.Šo metodi var izmantot atkārtoti, un katru reizi mikroskopā varat novērot, vai tā atbilst jūsu prasībām.
3. Zema ātruma centrifūgavar noņemt gružus, parasti 700 g, 5 min
4. Centrifugējot, ar nosacījumu, ka šūnu skaits ir pietiekams, samaziniet centrifugēšanas laiku, piemēram, 5 min, 1000 apgr./min, nevis 3 min, 1000 apgr./min, un noņemiet supernatantu, jo nekroze un gruveši parasti atrodas supernatantā!Šī darbība ir jāveic tikai vienu reizi mazgāšanas procesā pirms inkubācijas!

Lai gan ir daudzi veidi, kā noņemt šūnu atliekas, jūs atklāsiet, ka centrifugēšana ir viena no efektīvākajām metodēm!

Un tā kā augu audos un šūnās ir šūnu sienas, kas sastāv no celulozes, hemicelulozes un pektīna, parasti ir nepieciešams sasmalcināt kvarca smiltis vai stikla pulveri ar atbilstošu ekstrakcijas šķīdumu vai apstrādāt ar celulāzi, lai sasniegtu mērķi.Baktēriju šūnu fragmentācija ir grūtāka, jo viss baktēriju šūnu sienas skelets patiesībā ir peptidoglikāna cistisko makromolekulu kovalentā saite, kas ir ļoti izturīga.Izplatītākās baktēriju šūnu sienu sadalīšanas metodes ietver ultraskaņas drupināšanu, smilšu slīpēšanu, augsta spiediena ekstrūzijas vai lizocīma apstrādi.Pēc tam, kad audi un šūnas ir salauztas, tiek izvēlēts atbilstošs buferis, lai ekstrahētu vēlamo proteīnu.Nešķīstošos materiālus, piemēram, šūnu fragmentus noņem arcentrifūgavai filtrēšana.

lūdzu, sazinieties ar Whatsapp un Wechat: +86 180 8048 1709